ФЕДЕРАЛЬНОЕ АГЕНТСТВО ПО ВЫСОКОТЕХНОЛОГИЧНОЙ МЕДИЦИНСКОЙ ПОМОЩИФЕДЕРАЛЬНОЕ ГОСУДАРСТВЕННОЕ УЧРЕЖДЕНИЕ «ГОСУДАРСТВЕННЫЙ НАУЧНО-ИССЛЕДОВАТЕЛЬСКИЙ ЦЕНТР ПРОФИЛАКТИЧЕСКОЙ МЕДИЦИНЫ»
УТВЕРЖДАЮ
Директор ФГУ «ГНИЦ ПМ МЗСР РФ» академик РАМН, профессор
__________________ Р.Г.Оганов
“___”_________________ 2008 г.ОТЧЕТ
по изучению сравнительной фармакокинетики препаратов Ливарол (ОАО “Нижфарм”, Россия) и Низорал (“Янссен-Силаг Н.В.”, Бельгия)
рандомизированным перекрестным методомМосква – 2008
ОТВЕТСТВЕННЫЕ ИСПОЛНИТЕЛИ:
Руководитель отдела профилактической фармакотерапии ФГУ «Государственный научно-исследовательский центр профилактической медицины Росмедтехнологии», чл.-корр.РАЕН, профессор, д.м.н. С.Ю.Марцевич
Руководитель лаборатории фармакокинетики ФГУ «Государственный научно-исследовательский центр профилактической медицины Росмедтехнологии», канд. биол. наук В.Г.Белолипецкая
СВОДНАЯ ТАБЛИЦА ОСНОВНЫХ СВЕДЕНИЙ
Название работы Изучение сравнительной фармакокинетики препаратов Ливарол (ОАО “Нижфарм”, Россия) и Низорал (“Янссен-Силаг Н.В.”, Бельгия) рандомизированным перекрестным методом Испытуемые
количество
пол
возраст
вес
ростЗдоровые добровольцы
18
женщины
19 – 43 лет
50 – 85 кг
158– 176 смСхема построения испытания Рандомизированное, открытое, перекрестное исследование Тестируемый препарат (Т)
действующее вещество
форма выпуска
номер партии
срок годности
изготовитель
доза
тип приемаЛиварол
кетоконазол
суппозитории
381207
01.2010
«ОАО «Нижфарм», Россия
400 мг (1 суппозиторий)
однократноРеференс-препарат (R)
действующее вещество
форма выпуска
номер партии
срок годности
изготовитель
доза
тип приемаНизорал
кетоконазол
таблетки
7JL5B00
10.2012
«Янссен-Силаг Н.В.», Бельгия
200 мг (1 таблетка)
однократноГрафик забора проб До и через 0,5; 1; 1,5; 2; 3; 4; 5; 7; 10 и 24 часа после введения препарата Объем крови, взятый при исследовании 5 мл * 11 проб * 2 = 110 мл Параметры фармакокинетики и биоэквивалентности Cmax,Tmax, AUC0-t, AUC0-∞, MRT, Cmax/AUC0-t, f, f’,f” Заключение Кетоконазол практически не всасывается при применении препарата Ливарол производства ОАО «Нижфарм» (Россия) РЕЗЮМЕ
У 18 здоровых добровольцев изучена сравнительная фармакокинетика суппозиториев Ливарол (действующее вещество – кетоконазол) производства ОАО «Нижфарм» (Россия) после однократного введения в дозе 400 мг (1 суппозиторий). В качестве препарата сравнения использовали таблетки под названием Низорал производства «Янссен-Силаг Н.В.» (Бельгия). Концентрацию неизмененного кетоконазола в плазме крови определяли методом ВЭЖХ с УФ-детектированием. Установлено, что кетоконазол практически не всасывается при применении препарата Ливарол производства ОАО «Нижфарм» (Россия).
ВВЕДЕНИЕ
Кетоконазол – синтетическое производное имидазол диаксолана:
Активен в отношении дерматофитов, дрожжевых грибов (Torulopsis), возбудителя разноцветного лишая (Pityrosporum orbiculare), возбудителей системных микозов (Cryptococcus spp.), диморфных грибов, возбудителей некоторых дерматомикозов (Trichophyton spp., Epidermophyton floccosum, Microsporum spp.), возбудителей кандидоза (Candida spp.), высших грибов (эумицетов), а также в отношении грамположительных кокков (Staphylococcus spp., Streptococcus spp.). Механизм действия заключается в ингибировании синтеза эргостерола и липидов мембраны (триглицеридов и фосфолипидов), необходимых для синтеза клеточной стенки грибов (грибы теряют способность к образованию нитей и колоний), и нарушении проницаемости клеточной стенки. Ингибирует образование андрогенов.
При приеме внутрь абсорбция – высокая; время достижения Сmax – 1-2 ч. Биодоступность находится в прямой зависимости от величины принятой дозы. Связывается с белками плазмы крови и эритроцитами. Динамика концентрации в крови описывается биоэкспоненциальной кривой. Способен проникать в спинномозговую жидкость. Подвергается биотрансформации в печени (окислительное о-дезоксилирование, окислительная деградация, ароматическое гидроксилирование). Т1/2 первой фазы – 2, второй фазы – 8 ч. Выделяется с желчью (57%) и с мочой (13%). При наружном применении кетоконазол не всасывается и не поступает в системный кровоток, не определяется в плазме при длительном применении, поэтому системные эффекты не ожидаются.
Целью настоящего исследования, согласно Разрешению Федеральной службы по надзору в сфере здравоохранения и социального развития, является сравнительное изучение фармакокинетики и биоэквивалентности препаратов кетоконазола – суппозиториев вагинальных Ливарол производства ОАО «Нижфарм» (Россия) и таблеток Низорал производства «Янссен-Силаг Н.В.» (Бельгия).
МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
1. Выбор здоровых добровольцев
За 14 дней до первой госпитализации добровольцы были подвергнуты стандартному клиническому и лабораторному обследованию с целью дальнейшего допуска к участию в исследовании. Всего в исследование было включено 18 женщин, средний возраст которых составил 29,9 ± 7,1, средний рост – 165,3 ± 5,9, средний вес – 64,7 ± 9,2 (таблица 1).
Таблица 1. Основные антропометрические и демографические данные добровольцев, включенных в исследование
№ п/п Ф.И.О. Возраст (лет) Рост (см) Вес (кг) 1 БМИ 21 164 57 2 КЛС 24 160 61 3 ФРР 21 162 55 4 ЕЕА 27 165 64 5 ЛНВ 19 158 50 6 БАД 26 160 60 7 РАР 26 170 75 8 КМК 35 175 65 9 УЛИ 32 174 85 10 ДИВ 28 167 50 11 ГОИ 41 176 77 12 КЛН 43 164 63 13 СТА 27 164 61 14 КОВ 32 162 65 15 КОВ 26 171 73 16 ММВ 38 158 67 17 МТА 38 168 72 18 МТП 35 158 65 Mean 29,9 165,3 64,7 SD 7,1 5,9 9,2 max 43 176 85 min 19 158 50 Критерии включения в исследование:
- возраст 18 - 45 лет;
- верифицированный диагноз «здоров»: отсутствие патологии со стороны желудочно-кишечного тракта, печени, почек, сердечно-сосудистой системы, ЦНС (предварительно проведенные стандартные клинико-лабораторные и инструментальные исследования не выявили наличия каких-либо заболеваний);
- масса тела не выходит за пределы ± 15 % по весо-ростовому индексу Кетле;
- отрицательный тест на беременность и согласие придерживаться адекватных методов контрацепции (в случае использования гормональных контрацептивов, они должны быть отменены не менее чем за 2 месяца до начала исследования);
- наличие письменного согласия добровольца на включение в исследование.
Критерии исключения из исследования:
- отягощенный аллергологический анамнез;
- лекарственная непереносимость;
- хронические заболевания сердечно-сосудистой, бронхолегочной, нейроэндокринной системы, а также заболевания желудочно-кишечного тракта, печени, почек, крови;
- хирургические вмешательства на желудочно-кишечном тракте (за исключением аппендэктомии);
- острые инфекционные заболевания менее чем за 4 недели до начала исследования;
- регулярный прием лекарственных препаратов менее чем за 2 недели до начала исследования;
- прием лекарственных препаратов, оказывающих выраженное влияние на гемодинамику, функцию печени и др. (барбитураты, омепразол, циметидин и т.д.), менее чем за 2 месяца до начала исследования;
- желание добровольца прекратить свое участие в исследовании;
- донорская сдача крови (450 мл крови или плазмы и более) менее чем за 2 месяца до начала исследования
- участие в I фазе клинического испытания препаратов менее чем за 3 месяца до начала исследования;
- прием более чем 10 ед. алкоголя в неделю или анамнестические сведения об алкоголизме, наркомании, злоупотреблении лекарственными препаратами;
- курение более 10 сигарет в день;
- медицинские показания, возникшие в ходе исследования;
- несоблюдение добровольцем правил участия в исследовании.
2. Изучаемые препараты
Международное непатентованное название: кетоконазол
Препарат тестируемый (Т): Ливарол суппозитории по 0,4 г производства ОАО «Нижфарм», Россия. Серия препарата 381207, срок годности – до 01.2010.
Препарат сравнения (R): Низорал таблетки по 200 мг производства фирмы «Янссен-Силаг Н.В.», Бельгия. Серия препарата 7JL5B00, срок годности – до 10.2012.
3. Рандомизация добровольцев
Исследование проводили открытым рандомизированным методом по перекрестной схеме.
Рис. 1. Дизайн исследования.
Все включенные в исследование добровольцы были пронумерованы в таком порядке, в каком они поступали в клинику. В случайном порядке 9 из них вначале вводили 1 суппозиторий (400 мг) тестируемого препарата (Т), а затем спустя 7 дней – одну таблетку (200 мг) препарата сравнения (R). Другие 9 добровольцев в обратном порядке вначале получали Низорал – R, а затем Ливарол – Т. Решение, будет ли доброволец первоначально принимать тестируемый препарат или препарат сравнения, принималось случайно. Схема рандомизации представлена в таблице 2.
Таблица 2. Схема рандомизации здоровых добровольцев
№ добровольца 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 1-й визит T R R T R R T T T R R T T R T R T R 2-й визит R T T R T T R R R T T R R T R T R T
T – Ливарол
R – Низорал4. Протокол проведения исследования
В день исследования добровольцы прибывали к 8 часам утра в Государственный научно-исследовательский центр профилактической медицины (последний прием пищи – не позднее 20 часов накануне). Врач, руководящий исследованием, проводил клиническое обследование, измерял параметры гемодинамики – систолическое и диастолическое артериальное давление (САД и ДАД соответственно) и частоту сердечных сокращений (ЧСС) – и делал запись в индивидуальной карте добровольца.
Добровольцы были проинформированы о том, что во время всего исследования они должны соблюдать стандартный режим: не подвергаться физической и психической нагрузке, не употреблять спиртные напитки, кофе, чай и цитрусовые соки, а также не принимать никакие другие лекарственные препараты. В обязанности добровольцев также входило информирование врача-исследователя о любых изменениях режима и самочувствия во время и после проведения фармакокинетического исследования.
После получения полной информации о ходе исследования, при наличии письменного согласия волонтера, наличии у него всех критериев включения и отсутствии критериев исключения, проводилось страхование добровольца в соответствии с требованиями клинических испытаний, а затем доброволец госпитализировался в специальную палату 1-го клинического (кардиологического) отделения ГНИЦ ПМ на 1 сутки.
Приблизительно в 9 часов утра волонтерам вводили один из исследуемых препаратов. Дата введения исследуемых препаратов (госпитализации) запротоколирована. Таблетки принимали внутрь, не разжевывая, запивая 200 мл воды, суппозитории добровольцы вводили под контролем процедурной сестры согласно инструкции. Для отбора крови использовали разовые кубитальные катетеры (0-10 час) и одноразовые шприцы (24 час). Образцы крови отбирались из локтевой вены в количестве 5 мл в стеклянные пробирки с добавлением гепарина в дискретные интервалы времени в соответствии с таблицей 3.
Таблица 3. График отбора проб крови
№ пробы 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 Время после приема препарата (час) 0 1 1,5 2 2,5 3 4 5 7 10 24 Пробы центрифугировали 10 мин при 3000 об/мин, полученную плазму хранили при (-35°С) до анализа. Стабильность концентрации кетоконазола в плазме крови при (-35°С) в течение 1 месяца подтверждена экспериментально – в контрольных образцах плазмы с известным содержанием кетоконазола убыль определяемого вещества в течение всего срока хранения не наблюдалась.
Измерение параметров гемодинамики, а также забор крови, осуществлялись в положении сидя.
Питание добровольцев, начиная с обеда, осуществлялось в соответствии с графиком питания стационара.
5. Аналитические методы определения неизмененного кетоконазола в плазме крови здоровых добровольцев
Концентрацию неизмененного кетоконазола в плазме крови добровольцев определяли с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии с УФ-детектированием.
В работе использовали субстанцию кетоконазола, предоставленную фирмой – производителем.
Матричные растворы кетоконазола с концентрацией 1 мг/мл готовили с использованием метанола, из этих растворов готовили растворы стандартных образцов.
Для экстракции и элюентов использовались ацетонитрил, CuSO4, дигидрофосфат калия производства “Merck” (ФРГ). Вода – двухступенчатая очистка обратным осмосом и деионизированная (Millipore, Франция).
Подготовка проб плазмы для анализа
Для выделения кетоконазола и очистки экстракта к 0,50 мл сыворотки добавляли 50 мкл 5% водного раствора CuSO4 и 450 мкл ацетонитрила, встряхивали на vortex 5 минут и центрифугировали при 13000 об/мин в течение 10 минут. Отбирали надосадочную жидкость и аликвоту 50 мкл прозрачного раствора вводили в хроматограф. Степень извлечения кетоконазола в указанных условиях составила 95,5 ± 3,2
Хроматографическое определение
Анализ проводили на жидкостном хроматографе «KNAUER» (Германия), оснащенном автосамплером «Triathon 3800» и спектрофотометрическим детектором (К-2501) при 231 нм в изократическом режиме. Колонка – Kromasil 100-5-C18, 4.6*150 mm, 5μm. Температура разделения – 200С. Скорость потока – 1,0 мл/мин. Объем вводимой пробы – 50 мкл. Подвижная фаза состояла из 0,25 мМ KH2PO4 (рН=4,5) и ацетонитрила в объемном отношении 50:50. Время удерживания кетоконазола в этих условиях составило 5,4 мин.
Количественное определение проводили методом абсолютной калибровки с использованием программного обеспечения фирмы «Eurochrom 2000». Калибровочную кривую получали в результате анализа проб сыворотки с добавками известных количеств стандарта определяемого соединения. Калибровочная зависимость носила линейный характер в диапазоне концентраций 0,10 – 15,00 мкг/мл и описывалась уравнением:
С = 4,23S + 0,0934, (r2 = 0,998848).
где S – площадь хроматографического пика, С – концентрация кетоконазола (мкг/мл).
Минимальная обнаруживаемая концентрация кетоконазола составила 0,05 мкг/мл. Образцы хроматограмм представлены на рисунках 2 и 3, калибровочный график – на рисунке 4, метрологические характеристики методики – в таблице 4.
Таблица 4. Метрологические характеристики метода определения кетоконазола
Введено (мкг/мл) Найдено (мкг/мл) Mean SD SE CV Inter-day
5,000 5,15 4,90 4,69 4,56 4,57 4,77 0,25 0,11 5,25 Intra-day
5,000 4,45 4,90 5,05 5,09 4,71 4,84 0,26 0,12 5,46 Рис. 2. Хроматограмма интактной плазмы крови добровольца.
Injection Date : 25/11/08
Column : Kromasil 100-5-C18, 4.6*150 mm, 5um.
Mf. : KH2PO4 Buffer:AcN= 50:50
Flow : 1.0 ml/min
Temp. : 200C
UV : 231 nm
Inj. Volume : 50 ul
Sample name : serum
Method : C:\DATA\1\Methods\ket3_1_231
Рис. 3. Хроматограмма плазмы крови добровольца, получавшего Низорал.
Injection Date : 26/11/08
Column : Kromasil 100-5-C18, 4.6*150 mm, 5um.
Mf. : KH2PO4 Buffer:AcN= 50:50
Flow : 1.0 ml/min
Temp. : 200C
UV : 231 nm
Inj. Volume : 50 ul
Sample name : N 5
Method : C:\DATA\1\Methods\ket3_1_231
Рис. 4. Калибровочный график кетоконазола
Date : 25/11/2008
Calculate : External standard
based on : Peak area
Curve type : Linear
Calibration table
Ketoсonazol Concentr. [ug/ml] Area [mAU*min] Ret.time [min] 1 15 3,57449 5.422 2 10 2,32143 3 5 1,03025 4 1 0,239412 5 0,5 0,145777 6 0,1 0,031635 6. Расчет фармакокинетических параметров
Параметры фармакокинетики рассчитывали с помощью программы “M-IND” модельно-независимым методом. Вычисляли следующие параметры:
Cmax - максимальная концентрация – максимальное значение из измеренных;
Tmax - время достижения максимальной концентрации – время, при котором детектировалась максимальная концентрация;
AUC0-t – площадь под фармакокинетической кривой в пределах длительности наблюдения – рассчитывалась методом трапеций;
AUC0-∞ - площадь под фармакокинетической кривой - рассчитывали путем экстраполяции данных до бесконечности: AUC0-∞ = AUC0-t + Ct/kel , где Ct и kel –расчетные значения концентрации кетоконазола в последней пробе и константы элиминации, полученные с помощью метода линейной регрессии;
MRT – среднее время удержания лекарственного вещества в организме;
Cmax/AUC0-t - характеристика всасывания;
7. Статистическая обработка результатов
Статистическая обработка результатов выполнялась с помощью пакета EXCEL XP для персонального компьютера. Рисунки выполнены с помощью программы EXCEL XP.
Отчет составлен согласно требованиям Фармакологического комитета МЗ и СР РФ [3] в текстовом редакторе WORD XP.
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
1. Фармакокинетический анализ
Динамика концентраций кетоконазола в плазме крови здоровых добровольцев после однократного приема препаратов Ливарол и Низорал представлена в таблицах 5 и 6, а усредненные фармакокинетические кривые – на рисунке 5 (индивидуальные фармакокинетические профили и диапазоны изменения концентраций у различных добровольцев представлены на рисунках 6 – 24 в Приложении).
Рис. 5. Средние фармакокинетические профили кетоконазола у здоровых добровольцев после однократного введения 400 мг Ливарола (тест) и 200 мг Низорала (референс)
При применении суппозиториев Ливарол у большинства добровольцев кетоконазол в концентрациях выше предела обнаружения (0,050 μг/мл) не детектировался ни в одной пробе. У 2 добровольцев (№ 7 и 13) кетоконазол при введении Ливарола детектировался в нескольких пробах в концентрациях до 0,105 μг/мл, т.е. в десятки раз ниже, чем при применении таблеток Низорал.
Таблица 5. Динамика концентрации кетоконазола в плазме крови здоровых добровольцев после однократного введения 1 суппозитория (400 мг) Ливарола (Т – тест)
№ добровольца Время после приема препарата (час) 0,5 1 1,5 2 3 4 5 7 10 24 Концентрация кетоконазола (мкг/мл) 1 н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. 2 н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. 3 н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. 4 н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. 5 н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. 6 н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. 7 н.д. 0,05 0,05 0,09 0,09 0,05 н.д. н.д. н.д. н.д. 8 н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. 9 н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. 10 н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. 11 н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. 12 н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. 13 н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. 0,11 н.д. 0,07 0,05 0,05 14 н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. 15 н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. 16 н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. 17 н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. 18 н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. н.д. Mean н.д. 0,003 0,003 0,005 0,005 0,009 н.д. 0,004 0,003 0,003 SD - 0,012 0,012 0,021 0,020 0,027 - 0,016 0,012 0,011 C.V. - 424 424 424 424 311 - 424 424 424
н.д. – не детектируетсяТаблица 6. Динамика концентрации кетоконазола в плазме крови здоровых добровольцев после однократного приема 1 таблетки (200 мг) Низорала (R – референс)
№ добровольца Время после приема препарата (час) 0,5 1 1,5 2 3 4 5 7 10 24 Концентрация кетоконазола (мкг/мл) 1 5,33 8,56 5,13 4,09 1,9 2,54 1,31 0,83 0,25 н.д. 2 1,6 6,63 6,26 9,93 6,34 3,2 2,67 2,34 1,16 0,3 3 8,98 7,07 5,66 6,05 4,15 4,57 5,77 1,01 1,04 0,27 4 6,07 5,37 5,1 3,97 3,4 1,62 1,17 0,74 0,36 н.д. 5 6,64 7,56 7,28 4,95 4,43 3,55 1,75 0,94 0,68 0,153 6 3,47 6,7 7,16 8,79 12,94 7,05 5,1 2,65 1,97 0,45 7 0,36 1,44 1,37 2,62 4,05 2,9 2,23 0,75 н.д. н.д. 8 0,93 2,23 1,93 2,79 2,15 1,86 0,46 н.д. н.д. н.д. 9 2,86 4,59 5,22 4,01 3,93 1,66 0,87 0,54 0,2 0,054 10 0,42 0,9 4,3 0,73 10,69 6,03 1,2 0,23 0,24 н.д. 11 0,35 1,83 1,73 1,32 1,11 0,69 0,45 0,29 н.д. н.д. 12 2,84 3,18 1,59 0,66 1,54 0,24 н.д. н.д. н.д. н.д. 13 2,13 1,94 2,45 1,45 0,73 0,95 0,35 н.д. н.д. н.д. 14 2,1 1,76 2 1,48 2,79 4,09 0,9 0,35 н.д. н.д. 15 1,65 3,62 5,78 3,76 1,86 0,999 0,59 0,27 н.д. н.д. 16 0,39 1,48 2,03 2,17 1,86 1,2 0,54 0,34 н.д. н.д. 17 0,69 0,45 0,52 0,52 0,68 0,53 1,59 3,94 1,11 0,72 18 2,72 6,62 3,71 6,37 4,99 2,61 2,14 н.д. н.д. н.д. Mean 2,75 4,00 3,85 3,65 3,86 2,57 1,71 1,01 0,44 0,11 SD 2,49 2,65 2,17 2,74 3,31 1,91 1,56 1,10 0,59 0,20 C.V. 90,5 66,3 56,4 75,0 85,6 74,4 91,3 108,7 134,7 187,5
н.д. – не детектируетсяСредние и индивидуальные значения основных фармакокинетических параметров кетоконазола при применении Низорала представлены в таблице 7. Следует отметить высокую межиндивидуальную вариабельность параметров, что всегда характеризует препараты с полиморфизмом метаболических процессов.
Таблица 7. Фармакокинетические параметры кетоконазола у здоровых добровольцев после однократного приема 1 таблетки (200 мг) Низорала (R – референс)
№ добровольца AUC0-t
(мкг*ч /мл)Тmax
(ч)Cmax
(мкг/мл)MRT
(ч)Cmax/ AUC0-t
(ч-1)1 21,43 1,00 8,56 3,14 0,3994 2 46,05 2,00 9,93 7,09 0,2156 3 46,02 0,50 8,98 7,38 0,1951 4 20,41 0,50 6,07 3,63 0,2974 5 34,24 1,00 7,56 5,74 0,2208 6 69,42 3,00 12,94 7,62 0,1864 7 14,60 3,00 4,05 4,11 0,2774 8 8,88 2,00 2,79 2,77 0,3142 9 19,67 1,50 5,22 4,32 0,2654 10 22,81 3,00 10,69 3,67 0,4687 11 5,87 1,00 1,83 3,70 0,3118 12 5,96 1,00 3,18 2,02 0,5336 13 6,20 1,50 2,45 2,91 0,3952 14 12,62 4,00 4,09 3,43 0,3241 15 12,35 1,50 5,78 2,61 0,4680 16 7,79 2,00 2,17 3,34 0,2786 17 29,14 7,00 3,94 16,21 0,1352 18 19,97 1,00 6,62 3,31 0,3315 Mean 22,41 2,03 5,94 4,83 0,3121 SD 17,14 1,58 3,25 3,30 0,1074 Geom 17,32 1,61 5,10 4,20 0,2945 Mediana 19,82 1,50 5,50 3,65 0,3046 max 69,42 7,00 12,94 16,21 0,5336 min 5,87 0,50 1,83 2,02 0,1352 Фармакокинетические параметры при введении Ливарола у добровольцев № 7 и 13 не рассчитывались, принимая во внимание недостаточное число точек для построения кривых. При этом следует отметить, что результаты у добровольца № 13, скорее всего, являются артефактом, поскольку впервые кетоконазол определялся через 4 часа после введения суппозитория, через 5 часов – концентрация его была ниже предела обнаружения, а в последних пробах, в т.ч. и через 24 часа, кетоконазол вновь детектировался приблизительно на постоянном очень низком уровне, что вряд ли реально при известном периоде полувыведения. Возможно, это связано с нарушением добровольцем пищевого протокола.
Для оценки биодоступности кетоконазола f при применении Ливарола в сравнении с Низоралом у добровольцев № 7 и 13 рассчитали AUC0-t по имеющимся точкам, f’ вычисляли по максимальным измеренным концентрациям (табл. 8).
Таблица 8. Биодоступность кетоконазола при применении Ливарола (тест) в сравнении с Низоралом (референс)
Параметр № добровольца
7 13 f (%) :
AUC0-t, тест/ AUC0-t, референс0,95 8,25 f’ (%):
Cmax, тест/Cmax, референс1,10 2,15 2. Анализ побочных эффектов
Серьезные нежелательные явления при однократном введении суппозиториев Ливарол и таблеток Низорал не наблюдались. На первом визите доброволец № 1 отметила незначительный дискомфорт в области живота при введении Ливарола (тест), а доброволец № 16 – незначительную головную боль при приеме Низорала (референс).
З А К Л Ю Ч Е Н И Е
На основании полученных данных можно сделать вывод, что лекарственное средство Ливарол, суппозитории вагинальные 0,4 г, практически не всасывается при вагинальном применении у здоровых женщин.
Рис. 6 – 23. Индивидуальные фармакокинетические профили кетоконазола у здоровых добровольцев после однократного применения Ливарола (T-тест) и Низорала (R-референс)
Рис. 24. Диапазоны изменения концентраций кетоконазола у здоровых добровольцев после однократного приема Низорала (референс)
Список литературы
1. Агафонов А.А., Пиотровский В.К.. “Программа M-IND оценки системных параметров фармакокинетики модельно-независимым методом статистических моментов”. Хим.-Фарм. журнал.-1991- 10 - c. 16.
2. Проведение качественных исследований биоэквивалентности лекарственных средств. Методические указания. Москва – 2004.
3. Sunil Bajad, R. K. Johri, K. Singh, J. Singh and K. L. Bedi Simple high-performance liquid chromatography method for the simultaneous determination of ketoconazole and piperine in rat plasma and hepatocyte culture // International Symposium on High Performance Liquid Phase Separations and Related Techniques No25, Maastricht , PAYS-BAS(17/06/2001), 2002, vol. 949, no 1-2 (377p.) (15ref.), [Notes: Part II], p. 43-47.
| Июль 2009 г. |
